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描述

補(bǔ)體溶血活性是血漿或血清中補(bǔ)體的經(jīng)典和替代途徑的功能測(cè)試。經(jīng)典途徑方法 （CH50） 基于在 Ca++ 和 Mg++ 存在下裂解致敏的綿羊紅細(xì)胞。當(dāng)懷疑補(bǔ)體缺失或缺乏時(shí)，它作為篩查試驗(yàn)是有幫助的。該測(cè)試對(duì)通路任何組成部分的減少、缺失和/或不活躍敏感。

該方法也適用于評(píng)估藥物對(duì)補(bǔ)體成分抑制或消耗的影響。此外，根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) ISO 10993-4：2017，可以評(píng)估生物材料和醫(yī)療器械在血液、血漿或血清與生物材料接觸后的血液相容性。生物材料或藥物激活補(bǔ)體系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體蛋白的消耗，從而降低 CH50 水平。

應(yīng)用

測(cè)量經(jīng)典途徑補(bǔ)體活性?？梢苑治鰜?lái)自以下物種的血漿或血清樣品：人、豚鼠、倉(cāng)鼠、大鼠、兔、牛、豬、恒河猴和比格犬。該試劑盒僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用，不可用于診斷或治療程序。

原則

將紅細(xì)胞懸液與連續(xù)稀釋的血清或血漿在 37 oC 下孵育 30 分鐘。補(bǔ)體系統(tǒng)的激活將導(dǎo)致溶血。孵育后，將樣品離心以獲得上清液。上清液中的游離血紅蛋白濃度與補(bǔ)體活性成正比，通過分光光度計(jì)在 415 nm 波長(zhǎng)下測(cè)量。繪制血漿稀釋因子與溶血程度的關(guān)系圖可以計(jì)算 CH50（即稀釋血清以獲得 50% 的紅細(xì)胞裂解）。

陽(yáng)性參考是裂解液誘導(dǎo)的完全裂解，陰性參考是與稀釋緩沖液孵育后獲得的。